52遺傳物質(zhì)提取與粗分離

　　對于各種細胞的性質(zhì)差異而言，主要是由DNA決定的。

　　但是——

　　DNA具體是什么樣子的呢？所以，我們就來探討一下DNA的粗提取與鑒定，

　　首先，咱們要來分析一下DNA的狀態(tài)。通過以前的大量實驗，我們便已經(jīng)知道了DNA的性質(zhì)是白色的絲狀物。

　　在提取高純度DNA時，需要應用的有十六烷基三甲基溴化氨，這個物質(zhì)的簡稱CTAB。

　　還有就是十二烷基硫酸鈉簡稱為SBS。

　　而且，對于DNA與蛋白質(zhì)的溶解度而言，存在著一定的差異。具體來說，就是DNA的溶解度是在0.14摩爾每升的氯化鈉溶液當中溶解度最低。

　　但是——

　　蛋白質(zhì)卻是和DNA這種溶解差異大體相反。

　　蛋白質(zhì)溶解度大體不變，所以在提取DNA時，可以采用改變DNA溶解度的方式從而來控制DNA的分離。

　　但是DNA這種物質(zhì)還不會溶于酒精溶液，這個性質(zhì)和許多物質(zhì)不同。

　　而且DNA還具有耐高溫的性質(zhì)，蛋白質(zhì)在60到80攝氏度時已經(jīng)開始了變性失活。

　　而DNA則在80攝氏度以上才會發(fā)生變性。而且，當升高到80攝氏度以上的溫度之后，如果緩慢的降溫，最后DNA還會隨著溫度的降低會緩慢復原。

　　DNA不受蛋白酶的影響。蛋白酶當然是可以水解蛋白質(zhì)的了，畢竟它叫蛋白酶。

　　洗滌劑可以瓦解細胞膜，但是對DNA也是沒有影響的。所以在我們提取DNA的過程中，也需要用洗滌劑進行洗滌，以瓦解細胞為目的。

　　了解了DNA的性質(zhì)，再談談DNA的鑒定，實際就是二苯胺試劑。并且要現(xiàn)配現(xiàn)用。否則不會有效果或者效果十分不明顯。

　　接下來就是具體的實驗了，實驗的原理就是：DNA加上二苯胺試劑后，再在水浴加熱的條件下溶液會變成藍色。

　　首先是細胞的選擇，選用細胞時不可以用哺乳動物的成熟紅細胞。

　　因為哺乳動物的成熟紅細胞沒有細胞核和眾多細胞器，所以使用哺乳動物的成熟紅細胞更容易獲得蛋白質(zhì)，但是絕對得不到DNA。

　　所以在血紅蛋白的提取過程中，可以使用哺乳動物的成熟紅細胞比較便利，但是提取DNA絕不可以用這種細胞。

　　最后就是對細胞進行粉碎處理。

　　對于動物細胞，我們可以使用水滴吸水脹破的方法進行。破碎就是向動物細胞溶液當中加入足量的蒸餾水，這樣就可以使細胞破裂，從而進行粉碎。

　　而植物細胞則需要加入洗滌劑還有食鹽進行研磨，因為植物細胞存在的細胞壁具有保護支撐的作用，必須先將細胞壁進行一系列的操作，從而將細胞壁徹底粉碎在破裂。

　　之后就是除去雜質(zhì)，除去雜質(zhì)大致是利用溶解度的差異。就是前面我們講過的性質(zhì)：DNA在0.14摩爾每升的氯化鈉溶液中溶解度最低，而蛋白質(zhì)沒有這一系列的變化，從而進行分離提取。

　　所以我們就會在在0.14摩爾每升的氯化鈉溶液時，我們選取沉淀作為后續(xù)反應物質(zhì)。

　　在2摩爾每升的氯化鈉溶液中，我們愿用溶液進行購物反應。

　　接著我們加入嫩肉粉，因為在嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，這種酶可以分解蛋白質(zhì)。

　　這種蛋白酶可以進行蛋白質(zhì)的分解。

　　最后，就是要將濾液加入到60到75攝氏度的恒溫水浴箱中加入要嚴格要求溫度范圍。這個過程的目的就是將蛋白質(zhì)進行變性處理。從而達到過濾的目的。

　　之后就要進行DNA的析出與鑒定了。

　　DNA的析出需要加入百分之九十五的酒精溶液，從而可以產(chǎn)生白色的絲狀物，這白色的絲狀物就是DNA分子。

　　最后就需要對DNA分子進行鑒定。那么，我們需要將白色物質(zhì)用玻璃棒取出。在取出的時候一定要輕輕的攪拌，防止DNA分子斷裂，從而達不到實驗目的和實驗現(xiàn)象結果。

　　之后便將白色絲狀物用濾紙吸干水分，放入到兩摩爾每升的氯化鈉溶液當中，再加入200ml二苯胺溶液進行水浴加熱。

　　之后就可以直接觀察現(xiàn)象啦！